LD50 、LC50無資料。柴油的毒性類似于煤油，但由于添加劑（如硫化酯類）的影響，毒性可能比煤油略大。
主要有麻醉和刺激作用。未見職業中毒的報道。
毒性健康影響：柴油為高沸點成份，故使用時由于蒸汽所致的毒性機會較小。柴油的霧滴吸入后可致吸入性肺炎。皮膚接觸柴油可致接觸性皮炎。多見于兩手、腕部與前臂。柴油廢氣，內燃機燃燒柴油所產生的廢氣常能嚴重污染環境。廢氣中含有氮氧化物、一氧化碳、二氧化碳、醛類和不完全燃燒時的大量黑煙。黑煙中有未經燃燒的油霧、碳粒，一些高沸點的雜環和芳烴物質，并有些致癌物如3.4-苯并芘。
本品對人體侵入途徑：皮膚吸收為主、呼吸道吸入。
工作場所職業接觸限值中國MAC（最高容許濃度）無規定
美國TWA（時間加權平均濃度）無規定
預防方法：嚴格遵守操作規程，正確使用個人防護用品，不能用口吸堵塞油管。工作后淋浴，更衣，保持良好衛生習慣。